室间隔位于左右心室之间。
室间隔中部明显凸向右心室，凹向左心室，室间隔分为肌部和膜部。
且室间隔大部分为肌部，肌部由肌组织覆盖心内膜而成。
膜部的上界为主动脉右瓣和后瓣下缘，前界和下界为室间隔肌部，后界为右心房壁。
膜部被三尖瓣隔侧尖的附着缘分为房室部和室间部。
室间部范围甚小，且室间隔缺损多发生在室间隔膜部的室间部。