匿名
未登录
创建账户
登录
医学百科
搜索
查看“化学发光免疫分析仪”的源代码
来自医学百科
名字空间
页面
讨论
更多
更多
语言
页面选项
Read
查看源代码
历史
←
化学发光免疫分析仪
因为以下原因,您没有权限编辑本页:
您所请求的操作仅限于该用户组的用户使用:
用户
您可以查看和复制此页面的源代码。
[[化学发光免疫分析仪]]包含两个部分, 即[[免疫反应]]系统和[[化学发光]]分析系统。化学发光分析系统是利用化学发光物质经催化剂的[[催化]]和氧化剂的氧化, 形成一个激发态的中间体, 当这种激发态中间体回到稳定的基态时, 同时发射出[[光子]](hM) , 利用发光信号测量仪器测量光量子产额。免疫反应系统是将发光物质(在反应剂激发下生成激发态中间体) 直接标记在[[抗原]](化学发光免疫分析) 或[[抗体]]([[免疫化学]]发光分析) 上, 或酶作用于发光[[底物]]。 化学发光免疫分[[析法]]以标记方法的不同而分为两种: (1)化学发光标记[[免疫]]分析法; (2)[[酶标记]]、以化学发光底物作信号[[试剂]]的化学发光酶免疫分析法 化学发光标记免疫分析又称化学发光免疫分析(CL IA ) ,是用化学发光剂直接标记抗原或抗体的免疫分析方法。常用于标记的化学发光物质有[[吖啶]]酯类化合物——acridin ium ester (A E) ,是有效的发光[[标记物]][ 3 ] , 其通过起动发光试剂(N aOH2H2O 2 ) 作用而发光, 强烈的直接发光在一秒钟内完成,为快速的闪烁发光(见图1)。吖啶酯作为标记物用于免疫分析, 其化学反应简单、快速、无须催化剂; 检测小分子抗原采用竞争法 ,大分子抗原则采用夹心法 , 非特异性结合少, [[本底]]低; 与大分子的结合不会减小所产生的光量, 从而增加灵敏度。 从标记免疫分析角度, 化学发光酶免疫分析( chem ilum inescen t enzym e imm unoassay,CL E IA ) , 应属酶免疫分析, 只是[[酶反应]]的底物是发光剂,操作步骤与酶免分析完全相同[ 5 ]: 以酶标记生物活性物质(如酶标记的抗原或抗体) 进行免疫反应, 免疫反应[[复合物]]上的酶再作用于发光底物,在信号试剂作用下发光, 用发光信号测定仪进行发光测定。目前常用的标记酶为[[辣根]]过氧化物酶(HRP) 和[[碱性磷酸酶]](AL P) ,它们有各自的发光底物。 HRP 标记的CLEIA常用的底物为鲁米诺(32氨基邻苯二[[甲酰]]肼,lum ino l) ,或其[[衍生物]]如异鲁米诺(42氨基邻苯二甲酰肼) , 是一类重要的发光试剂。其结构如图4 所示。鲁米诺的氧化反应在碱性[[缓冲液]]中进行,在过氧化物酶及活性氧[ 过氧化阴离子(O 2- ) , 单线态氧(1O 2 ) , 羟[[自由基]](OH.) , [[过氧化氢]](H2O 2)]存在下,生成激发态中间体, 当其回到基态时发光, 其波长为425nm。 早期用鲁米诺直接标记抗原(或抗体) ,但标记后发光强度降低而使灵敏度受到影响。近来用过氧化物酶标记抗体, 进行免疫反应后利用鲁米诺作为发光底物, 在过氧化物酶和起动发光试剂(NaOH2H2O 2) 作用下, 鲁米诺发光, 发光强度依赖于酶免疫反应物中酶的浓度。Kodak Am erliteTM半自动分析系统就是利用这一体系专门设计的。 增强发光酶免疫分析(enhanced lum ines2cence enzym e imm unoassay, ELEIA )在发光系统中加入增强发光剂, 如对2碘[[苯酚]]等, 以增强发光信号,并在较长时间内保持稳定, 便于重复测量, 从而提高分析灵敏度和准确性。在全自动分析仪上, 还可通过计算机严密控制, 进行自动操作, 如加试剂,混合, [[温育]], 洗涤, 加发光试剂, 发光计数, 数据处理, 绘制标准曲线, 直至完成病人[[血清]]样品的分析并打印出结果。Am erliteTM发光增强酶免分析系统用[[荧光素]]、[[噻唑]]等增强剂, 其发光时间可持续长达20m in, [[试剂盒]]有[[甲状腺]]功能检测的 [[促甲状腺素]]、[[三碘甲腺原氨酸]]、[[甲状腺素]]、[[甲状腺素结合球蛋白]]、[[游离甲状腺素]], 与[[性激素]]有关的有[[促黄体激素]]、[[促卵泡激素]]、[[人绒毛膜促性腺激素]]、[[甲胎蛋白]]、[[雌二醇]]、[[睾酮]], 以及其他方面的如[[癌胚抗原]]、[[铁蛋白]]、[[地高辛]]等。 ALP标记的CLEIA所用底物为环1, 22二氧乙烷衍生物, 这是一类很有前途的发光底物 ,用于化学发光酶免分析底物而设计的分子结构中包含起稳定作用的基团——金刚烷基, 其[[分子]]中发光基团为芳香基团和酶作用的基团,在酶及起动发光试剂作用下引起化学发光。最常使用的底物是AM PPD [ 32(2’2 sp iroadam an2tane ) 42methoxy242( 3’2 pho spho ryloxy) 2phenyl21,22dioxetane ], 中文名为: 32(2’2螺金刚烷) 242[[甲氧基]]242(3’2 磷酰氧基) 2[[苯基]]21, 22环二氧乙烷)。在碱性磷酸酶(AL P) 作用下,[[磷酸酯]]基发生水解而脱去一个[[磷酸基]], 得到一个中等稳定的中间体AM PD (半寿期为2~ 30m in) ,此中间体经分子内电子转移裂解为一分子的金刚烷酮和一分子处于激发态的间氧[[苯甲酸]]甲酯阴离子, 当其回到基态时产生470nm 的光,可持续几十分钟。AM PPD 为[[磷酸酯酶]]的直接化学发光底物,可用来检测碱性磷[[酸酯]]酶或酶和抗体、[[核酸]][[探针]]及其它配基的[[结合物]]。可检测到碱性磷酸酯酶的浓度为10- 15mo l?L 。 [[分类:检验医学]]
返回至
化学发光免疫分析仪
。
导航
导航
最近更改
随机页面
Wiki工具
Wiki工具
特殊页面
页面工具
页面工具
用户页面工具
更多
链入页面
相关更改
页面信息
页面日志