匿名
未登录
创建账户
登录
医学百科
搜索
查看“基础检验学/血红蛋白测定”的源代码
来自医学百科
名字空间
页面
讨论
更多
更多
语言
页面选项
Read
查看源代码
历史
←
基础检验学/血红蛋白测定
因为以下原因,您没有权限编辑本页:
您所请求的操作仅限于该用户组的用户使用:
用户
您可以查看和复制此页面的源代码。
{{Hierarchy header}} (一)[[血红蛋白]]分子结构及成分 血红蛋白是在人体有核[[红细胞]]及[[网织红细胞]]内匐成的一种含色素辅基的[[结合蛋白质]]。[[色素部]]分是亚铁血红素,蛋白质部分是珠蛋折,血红素是由[[原卟啉]]和铁原子组成的一种[[结合物]],亚铁原子的六个配位键中的四个与原卟啉的四个吡咯坏的氮原子相边,一个与[[珠蛋白]]的肽链F肽段第八个[[氨基酸]]------[[组氨酸]]的[[咪唑基]]相边,另一个键则可逆性地与氧结合,完成运氧功能。当各种原困使Fe<sup>2+</sup>氧化成Fe<sup>3+</sup>即丧失携氧功能。与一切[[蛋白质]]结构一样,[[Hb]]的珠蛋白部分是由两条α链(α链及[[胚胎]]时的ξ链)和两条非α链(β链、γ链、δ链及胚胎时的ε链)组成。α链由141个氨基酸组成,β链由146个氨基酸组成。两对肽链聚合成四聚体、即Hb[[分子]],亚铁血红素结构见图2-2。 {{图片|gofnpy52.jpg|亚铁血红素结构式}} 图2-2 亚铁血红素结构式 Hb的合成受[[激素]]的调节,影响Hb合成的激素有两种.一种是[[红细胞生成素]],可促δ-氨基-γ[[酮戊酸]](ALA)生成与铁的利用,从而促进血红素和Hb 二是[[雄激素]],[[睾酮]]在[[肝脏]]内由5-β[[还原酶]]转变为5-β氢睾酮,它能促进ALA[[合成酶]]的生成.雄激还能促进红细胞生成素的生成,直接和间接促进Hb的合成.当血红素合成过多时,血红素自发氧化为高铁血红素,[[高铁血红素]]对ALA合成酶有直接抑制作用,关能[[阻遏]]ALA合成酶生成,进而减少血红素的合成. 在人体不同生长时期Hb种类与比例不同.在[[胚胎发育]]早期,大约于[[妊娠]]第5周,ζ与ε[[基因]]即表达于[[卵黄囊]]的[[成红细胞]]中,形成了人[[个体发育]]中第一个有功能的胚胎期血红蛋白四聚体ζ<sub>2</sub>ε<sub>2</sub>(HbGower I)在妊娠第6 周,成红细胞开始由卵黄囊游移到肝脏,此时ζ表达水平显著降低,α和γ基因开始表达,由这些肽链组成3种胚胎期血红蛋白,好Hb GowerI(ζ<sub>2</sub>ε<sub>2</sub>),Hb GowerⅡ(α<sub>2</sub>ε<sub>2</sub>),HbPortland(ζ<sub>2</sub>γ<sub>2</sub>)和一种[[胎儿]]血红蛋白HbF(α<sub>2</sub>γ<sub>2</sub>),到胚胎发育第8周,ζ和ε链逐渐消失,γ链合成达到最高峰,而且开始有β链合成,即有成人血红蛋白HbA(α<sub>2</sub>β<sub>2</sub>)产生。36周后β链合成迅速增加,γ链合成速率降低,出生后不久可见β与γ链合成大致等量,生后3个月由于链合成继续增加,而γ链合成迅速降低而至HbA占绝对优势,逐步占95%以上。而HbA逐步下降到小于等于1%。δ链开始合成的确切时间不很清楚,由于[[脐带]]血中存在微量的δ链,说明它在胎儿时期已经开始合成,出生后占Hb总量的2%-3%。成有血红蛋白按不携氧计算[[分子量]]为64458。 在正常状态机体有99%Hb的铁原妇呈Fe<sup>2+</sup>状态,称为还原Hb ,1%o Fe<sup>3+</sup>为高铁血红蛋白只有亚铁状态的Hb才能与氧结合,此时称氧合血红蛋白。[[一氧化碳]]与可以与Hb结合[[碳氧血红蛋白]]且其结合力高于氧结合力210倍,如果HbO<sub>2</sub>在含人有苯肼和[[硫化氢]]的环境中即转变为硫化血红蛋白。SHb常可出现在服用[[阿司匹林]]和可等待困患者血中。 (二)氰化高铁积压红[[蛋白]]测定法 自从1875年Gower设计了稀释[[溶血液]]目测比色法以来,血液学工作者对Hb测定进行了大量探讨,大致分为①根据Hb分子组成测定总Hb法(全血铁法);②根据[[血液]][[物理]]物性测Hb([[比重]]法、折射仪法);③根据Hb与O<sub>2</sub>可逆性结合的物性测Hb(血气分折法)和④根据Hb[[衍生物]][[光谱]]特点进行的定量测定法等四大类,其中有些方法简单易行,而得到长期广泛应用(如沙利法),但随着技术的进步和研究的深入,缺点日渐显著,逐渐被淘汰。为统一Hb测定方法,1966年国际血液学标准化委员全推荐氰化[[高铁血红蛋白]]测定法作为国际Hb测定标准法。1978年国际临床[[化学]]联合会和世界[[病理学]]会联合会发表的国际性文件中重申了HICN法。 [原理] 血液在血红蛋白转化液中[[溶血]]后,除SHb外各种血红蛋白均可被高铁氰化钾氧化高铁血红蛋白,再与CN<sup>-</sup>结合生成稳定的棕红色氰化高铁积压红蛋白。HICN最大吸收波峰在540nm,最小吸收谷为504nm。特定标准条件下,毫[[摩尔消光系数]]为44L.mmol<sup>-1.</sup>cm.因此根据[[标本]]的吸光度,即可救是血红蛋白浓度。HICN吸收光谱曲线特点见图2-3。 {{图片|gofnq5yp.jpg|氰化高铁血红蛋白光谱吸收曲线}} 图2-3 氰化高铁血红蛋白光谱吸收曲线 在没有符合[[WHO]]标准的[[分光光度计]]的条件下,亦可用HICN参考液制标准曲缍,或耱出换算常数,间接计算血红蛋白浓度(g/l)。 [方法学评价] HICN法具有操作简单、显色快且稳定(显色后如保存得当可六年不退色),除SHb外各种血红蛋白均可检测、读取吸光度后可直接定值等优点。 HICN的消光系数是44mmol<sup>-1</sup>.cm<sup>-1</sup><sup>。</sup>可根据下式进行计算: A/44×64458(mg)/1000×251=A×367.7=Hb(g/l) 式中A 是在540nm处HICN吸光度,64458mg是Hb 的毫克分子量,1000是将毫克转换为克,251是实验时血液的稀释倍数。但使用367.7这处常数是有条件的,是基于在仪器,比色杯,[[试剂]]及操作均严格的要求下,才能直接使用。仪器的校正是测定的关键,决定着测定结果的准确与否。在实际工作中,使用的分光光度计很难达到上述要求,往往通过K值来校正结果,定期地检查K值十分重要。HICN法被列为国际[[血红蛋白测定]]的参考方法。HICN法逐渐在国内普及,对Hb测定的标准化起了一定作用,但在实际应用中尚存在一些问题,关非理想的方法。其致命点是KCN有剧毒,使用管理不当可造成公害,此外高[[白细胞]]和[[高球蛋白血症]]可致混浊,以及HbCO转化较慢的问题也未完全解决。 实际工作中,多采用替代方法进行Hb测定,将其结果校下在到HICN法水平。国内多采用[[十二烷基硫酸钠]]血红蛋白测定法,其原理是,除SHb外,血液中各种Hb均可与低浓度SDS作用,生居SDS-Hb棕红色[[化合物]]。其吸收曲线波峰在538nm,小组谷在500nm [[肩峰]]在560nm。由于摩尔消光系数尚未最后确认,因此不能用吸光度A直接计算Hb浓度。本法可用HICN法定值的抗凝血或溶血液,制备标准[[工作曲线]],间接计算血红蛋白浓度本法的优点是操作简单,呈色稳定,准确性和精确性符合要求无公害,在全国临床检验方法学学术会议上,被推荐为次选方法。但SDS本身质量差异较大且SDS破坏白细胞,不适于同时蛤有计数白细胞和Hb定量两种功能和[[血细胞分析]]仪使用。 [[叠氮]]高铁血红蛋白测定法具有与HICN相似的优点,最大吸收峰在542nm,且峰值高度几乎与HICN者重合,文献报道HICN与HIN<sub>3</sub>两者结果回归方程的截距仅为0.013或为0,实验时显色快且稳定。试剂[[毒性]]仅为HICN者的1/7,至今仍有人用于临床,但仍存在公害问题。 Zander(1984)年提出碱羟血红蛋白(AHD575)测定法,575nm为其检出波长。该法试剂简单,不含有毒剂。呈色稳定,可用氯化血素作标准品,已被许多单位采用。但由于自动积压[[细胞]]分析仪或血红蛋白测定仪多采用540nm左右范围滤光板(图为HICN最大吸收峰在540nm),限制了此法在该类仪器的使用。 沙利酸化血红蛋白测定法。虽操作简单但误差较大,已被列为县以上[[医院]]淘汰的实验项目。 近年来,多参数[[血细胞]]公析仪的应用,使Hb测定逐步以仪器法取代手工法,其优点是操作简单、快速,同时可以获得多项红细胞的参数,但由于各型号仪器使用的溶血剂不同,形成Hb的衍生物不同。某些溶血剂形面的衍生物稳定性较差(如2%十六基三甲基[[溴化铵]]),因此要严格控制血剂加入量及溶血时间,特别半自动血细胞分析仪严格控制实验条件。有些溶血剂内虽加入了KCN,但其衍生拖把关非是HICN,仪器要经过HICN标准液校正后,才能进行Hb测定。 ==参看== *[[血红蛋白测定]] {{Hierarchy footer}} {{临床基础检验学图书专题}}
该页面使用的模板:
模板:Hierarchy footer
(
查看源代码
)
模板:Hierarchy header
(
查看源代码
)
模板:临床基础检验学图书专题
(
查看源代码
)
模板:图片
(
查看源代码
)
返回至
基础检验学/血红蛋白测定
。
导航
导航
最近更改
随机页面
Wiki工具
Wiki工具
特殊页面
页面工具
页面工具
用户页面工具
更多
链入页面
相关更改
页面信息
页面日志