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医学免疫学/检测的原理
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{{Hierarchy header}} 借助[[抗原]]和[[抗体]]在体外特异结合后出现的各种现象,对样品中的抗原或抗体进行定性、定量、定位的检测。 1.抗原与抗体的亲和力(affinity)[[抗原抗体]]的结合就像酶与[[底物]]的结合,[[激素]]与其[[受体]]的结合一样不是[[化学]]的反应,而是非[[共价键]]的可逆的结合。[[抗原决定簇]]和抗体[[分子]]可变区互补[[构型]],造成两分子间有较强的亲和力。空间构型互补程度不同,抗原和抗体分子之间结合力强弱也不同。互补程度高,则亲和力强。此外,反应温度、[[酸碱度]]和离子浓度对抗原和抗体分子上各[[基因]]的[[解离]]性和电荷特性也有重要的影响,抗体与抗原决定簇之间的结合力大小可用[[亲合力]]来表示。高亲合力的抗体与抗原的结合力强,即使抗原浓度很低时也有较多的抗体结合抗原形成[[免疫复合物]]。 2.抗原或抗体外检测原理根据[[抗原抗体结合]]形成免疫复合物的性状与活性特点,对[[标本]]中的抗原或抗体进行定性、定位或定量的检测。定性和定位检测比较简单,即用已知的抗体和待检样品混合,经过一段时间,若有免疫复合物形成的现象发生,就说明待检样品中有相应的抗原存在。若无预期的现象发生,则说明样品中无相应的抗原存在。同理也可用已知的抗原检测样品中是否有相应抗体。 对抗原或抗体进行定量检测时,以反应中加入抗原和抗体的浓度与形成[[免疫]]复物的浓度呈函数关系。 (1)根据免疫复合物产生的多少来推算样品中抗原(或抗体)的含量:在一定的反应条件下,加入的已知抗体(或抗原)的浓度一定,反应产生的免疫复合物多少与待检样品中含有相应抗原(或抗体)量成正比。也就是抗体浓度一定时,免疫复合物越多则样品中的抗原量也越多。可用实验性标准曲线推算出样品中抗原(或抗体)的含量。如免疫[[单向扩散]]试验、免疫比浊试验和[[酶联免疫]]检测等都属于这类方法。 (2)抗原或[[抗体效价]][[滴定]]的原理:当[[抗原抗体复合物]]形成多少不能反应[[抗原抗体反应]]强弱时,就不能以检测反应强度来对抗原或抗体进行定量。在实际工作中,把浓度低的反应成分(抗原或抗体)的浓度固定,把浓度高的另一种反应成分作一系列稀释。例如用人[[血清]]作抗原免疫3只家兔,比较3只家兔产生抗体的多少,即滴定3只[[兔血]]清抗体效价,可用双向[[琼脂]]扩散法来滴定,例如将抗体浓度固定,将抗原作不同的稀释度,分别将抗原或抗体滴入琼脂的相应小孔中,观察免疫兔血清与不同稀释度的抗原出现明显沉淀浅的抗原稀释度(如甲兔的抗体效价为1/2000,而丙免的是1/8000则可比较出后者比前者产生抗体的[[效价]]要高)。也就是表示效价的稀释度越高,样品中所含待检成分越多。因人血清(抗原)和抗体(免疫兔血清)相比,浓度高,故应稀释抗原。 {{Hierarchy footer}} {{医学免疫学图书专题}}
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