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基础检验学/抗凝剂
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{{Hierarchy header}} 抗凝剂种类很多,性质各异,必须根据检验止的适当选择,才能获得预期的结果。现将实验常用抗凝剂及其使用方法简述如下: 1、[[乙二胺]]四乙酸(EDTA)盐 EDTA有二钠、二钾和三钾盐。均可与钙离子结全成螯合物,从而阻止[[血液凝固]]。 [[Na]]<sub>2</sub>C<sub>10</sub>H<sub>14</sub>O<sub>8</sub>N<sub>2</sub>+C<sub>A</sub><sup>2+</sup>→C<sub>A</sub>C<sub>10</sub>H<sub>12</sub>O<sub>8</sub>N<sub>2</sub>+2N<sub>A</sub><sup>+</sup>+2H<sup>+</sup> EDTA盐经100<sup>0</sup>C烘干,[[抗凝作用]]不变,通常配成15g/L水溶液,每瓶0.4ml,干燥后可抗凝5ml[[血液]]。EDTA盐对红、[[白细胞]]形态影响很小,根据国际血液学标准公委员会(International committee standard of hematology ,ICSH)1993年文件建议,[[血细胞]]计数用EDTA二钾作抗凝剂,用量为EDTA-K2。2H2O1.5-2.2[[Mg]] (4.45±0.85μmol)/ml血液。EDTA-NA与EDTA-K2对血细胞计数影响均较小,但二钠溶解度明显低于二钾,有时影响抗凝效果,其他抗凝剂不适合于血细胞计数。表1-1是几种抗凝剂对白[[细胞计数]]的影响,EDTA影响小板聚集,不适合于作[[凝血]]象检查和[[血小板]]功能试验。 表1-1 不同抗凝剂不同条件保存血液的[[WBC]]变化(×10<sup>9</sup>/L) {| class="wikitable" |- | | | | 4<sup>0</sup>C | | 20<sup>0</sup>C | | 32<sup>0</sup>C |- | | | | 30‘1h 2h 4h 8h | | 30’1h 2h 4h 8h | | 30’1h 2h 4h 8h |- | | EDTA-K2 | | 6.6 6.5 6.56.5 6.5 | | 6.5 6.5 6.56.5 6.5 | | 6.4 6.5 6.56.5 6.5 |- | | EDTA-NA | | 6.3 6.2 6.36.4 6.5 | | 6.3 6.3 6.46.3 6.4 | | 6.3 6.3 6.46.3 6.3 |- | | [[肝素]] | | 5.6 4.9 | | 5.3 5.14.23.6 | | 5.6 5.6 5.65.3 |- | | 敬椽酸钠 | | 6.5 6.2 6.05.6 5.6 | | 6.4 6.3 6.26.0 5.8 | | 5.9 5.9 6.05.8 5.7 |} 2.枸椽酸钠(trisodiumcitrate)枸椽酸盐可与血中钙离子形成可溶性螯合物,从而阻止血液凝固。 2N<sub>a3</sub>C<sub>6</sub>H<sub>5</sub>O<sub>7</sub>+2C<sub>A</sub><sup>2+</sup>→2C<sub>A</sub>C<sub>6</sub>H<sub>5</sub>O<sub>7</sub><sup>-</sup>+6N<sub>a</sub><sup>+</sup> 枸椽酸钠有2Na<sub>3</sub>C<sub>6</sub>H5<sub>O</sub>7。和2N<sub>a3</sub>C<sub>6</sub>H<sub>5</sub><sub>。</sub>11H<sub>2</sub>O等多种[[晶体]]。通常用前者配成109mmol/l(32g/l)水溶液(也有用106mmol/l浓度),与血液按1:9或1:4比例使用。枸椽钠对凝血V因子有较好的保护作用,使其活性减低缓,故常用于凝血象的检查,也用于[[红细胞]]沉降率的测定。因[[毒性]]小,是输积压保养中的成分之一。 由于枸椽酸钠溶液是按体积肥比例加入血液内达到抗凝目的的,而抗凝剂主要是作用于积压浆成分,通常所谓的1:9比例抗凝的概念是提1份体积的抗凝剂作用9份红细胞比积正常血液内的[[血浆]]成分而言。所以台果对[[贫血]]或[[红细胞增多症]]患者的血液仍按1:9的比例加入抗凝剂时,就会发生抗凝剂足或相对过多,这将明显地影响凝象检查结果。为了避免这种现象,有文献报道应根据抗凝剂用量(ml)=0.00185×[[血量]]×(100—病人红细胞比积%)这一公式,来计算抗凝剂的用量。 3.草酸钠(sodiumoxalate)草酸盐可与血中钙离子生成草酸钙沉淀,从而阻止血液凝固。 草酸钠通常用0.1mol/L浓度,与血液按1:9比例使用,过去主要用于凝务象检查。实践发现草酸盐对凝备V因子保护功能差,影响[[凝血酶原时间]]测定效果;另外由于草酸盐与钙结合形成的是沉淀物,影响自动凝血仪的使用,因此,多数学者认为凝积压象检查选用枸椽酸钠为抗凝剂更为适宜。 4.肝素(heparin)肝素广泛在于肺、肝、脾等几乎所有组织和[[血管]]周围[[肥大细胞]]和暑碱性[[粒细胞]]的颗粒中。它是一种含[[硫酸]]基团的[[粘多糖]],是分散物质,平均[[分子量]]为15000(2000-40000)。肝素可加强[[抗凝血酶]]Ⅲ(AT-Ⅲ)[[灭活]][[丝氨酸蛋白酶]],从而具有阻止[[凝血酶]]形成,对抗凝血酶和阻止[[血小板聚集]]等多种作用。每毫升血液抗凝需要持素15±2.5Iu 。尽管肝素可以保持红细胞的自然形态,但由于其常可引起白细胞聚集关使用[[涂片]]在罗氏()[[染色]]时产生蓝色背景,因此肝素抗凝血不适全血液学一般检查。肝素是红细胞透渗脆性试验理想的抗凝剂。 {{Hierarchy footer}} {{临床基础检验学图书专题}}
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