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成纤维细胞
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[[成纤维细胞]](fibroblast)成纤维细胞是[[疏松结缔组织]]的主要[[细胞成分]],[[细胞]]呈梭形或扁的星状{{百科小图片|bk8o4.jpg|}},具有突起。根据不同的功能活动状态,将细胞分为成纤维细胞和[[纤维细胞]]二型:成纤维细胞乃是功能活动旺盛的细胞,细胞和[[细胞核]]较大,轮廓清楚,[[核仁]]大而明显,[[细胞质]]弱[[嗜碱性]],具明显的[[蛋白质合成]]和分泌活动;纤维细胞(fibrocyte)功能活动不活跃,细胞轮廓不明显,核小着色深,核仁不明显,细胞质少。此二型细胞可互相转化。 ==来源及特征== 成纤维细胞:数目最多,[[胞体]]大,为多突的纺锤形或星形的[[扁平细胞]],细胞核呈规则的卵圆形,细胞轮廓不清。 成纤维细胞摄取所需的[[氨基酸]],如[[脯氨酸]]和[[赖氨酸]]等,在[[粗面内质网]]的[[核蛋白体]]上合成前α[[多肽]]链(proalpha polypeptide chain),多肽链输送到[[高尔基复合体]]后,组成[[前胶原]][[分子]](procollagen)。前胶原分子由分泌[[囊泡]]带到[[细胞表面]],然后通过[[胞吐作用]]释放到细胞外。在前[[胶原]][[肽酶]][[催化]]下,将每一前α多肽链的尾段除去,成为[[原胶原]]分子(tropocollagen)。许多原胶原分子成行平行排列,结合成具有[[周期性]][[横纹]]的胶原[[原纤维]]。由胶原原纤维互相结合形成[[胶原纤维]]。 是[[结缔组织]]中最常见的细胞,由[[胚胎时期]]的间充质细胞(mesenchymal cell)[[分化]]而来。在结缔组织中,成纤维细胞还以其成熟状态—纤维细胞(fibrocyte)的形式存在,二者在一定条件下可以互相转变。 不同类型的结缔组织含成纤维细胞的数量不同。通常,疏松结缔组织中成纤维细胞的数量比同样体积的[[致密结缔组织]]中所含成纤维细胞的数量要少,故分离培养成纤维细胞多以[[真皮]]等致密结缔组织为取材部位〔2,3〕。 成纤维细胞形态多样,常见的有梭形、大多角形和扁平星形等,其形态尚可依细胞的功能变化及其附着处的[[物理]]性状不同而发生改变。成纤维细胞胞体较大,[[胞质]]弱嗜碱性,[[胞核]]较大呈椭圆形,[[染色质]]疏松着色浅,核仁明显。电镜下,其胞质可见丰富的粗面内质网、[[游离核]]糖体和发达的高尔基复合体,表明它具有合成和[[分泌蛋白]]质的功能。成纤维细胞尚可合成和分泌胶原纤维、[[弹性纤维]]、[[网状纤维]]及有机[[基质]]。它合成的前胶原[[蛋白]]分子经[[内切酶]]作用,聚合和重排,可形成与[[成骨细胞]]合成分泌的胶原原纤维一样具有64nm(640Å)周期横纹的胶原原纤维,胶原原纤维经互相粘合形成胶原纤维。经检测,这两种细胞合成分泌的胶原纤维均是Ⅰ型胶原纤维,在形态和[[生化]]结构上完全相同〔4,5〕。 处于[[成熟期]]或称静止状态的成纤维细胞,胞体变小,呈长梭形,粗面内质网和高尔基复合体均不发达,被称为纤维细胞。在外伤等因素刺激下,部分纤维细胞可重新转变为幼稚的成纤维细胞,其功能活动也得以恢复,参与组织损伤后的修复。另外,在结缔组织中,仍保留着少量具有分化潜能的间充质细胞,它们在创伤修复等情况下可[[增殖]]分化为成纤维细胞。 ==创伤修复== ===一般创伤修复=== 各种[[创伤]]均会造成不同程度的细胞变性、[[坏死]]和组织缺损,必须通过细胞[[增生]]和细胞间基质的形成来进行[[组织修复]]。在此修复过程中,成纤维细胞起着十分重要的作用。以伤口愈合过程为例,成纤维细胞通过[[有丝分裂]]大量增殖,并从4~5天或6天开始合成和分泌大量的胶原纤维和基质成分,与新生[[毛细血管]]等共同形成[[肉芽组织]],填补[[伤口]]组织缺损,为[[表皮细胞]]的覆盖创造条件。在伤口愈合中,成纤维细胞主要来源于真皮[[乳头层]]的局部成纤维细胞和未分化的间充质细胞,以及[[血管]]周围的成纤维细胞和[[周细胞]]。[[内脏]]损伤时,参与修复过程的成纤维细胞多来自间质和[[包膜]],以及粘膜下或[[浆膜]]下层的结缔组织。有人认为[[创伤愈合]]过程中伤处聚集的大量成纤维细胞,一方面是由成纤维细胞通过分裂增殖而来,另一方面,更多地是由邻近的间充质细胞、纤维细胞和毛细血管周细胞等演变或游走到伤处。在创伤修复的后期,成纤维细胞通过分泌[[胶原酶]]参与修复后组织的改建。在某些[[病理]]条件下,以成纤维细胞为主要细胞成分的肉芽组织或增生组织块还可以在非[[骨组织]]内发生[[钙化]],引起异位[[骨化]](ectopic ossification)。但对于异位骨化的参与细胞及其机制尚不十分清楚,未分化间充质细胞、成纤维细胞、[[内皮细胞]]和毛细血管周细胞等可划归为诱导性骨祖细胞的细胞都有可能参与这一过程 ===骨创伤修复=== 最简单和常见的骨创伤即是[[骨折]],其愈合过程须经过炎性反应、清扫、[[纤维]][[骨痂]]和骨性骨痂4个阶段。不同阶段参与的细胞主体不同。成纤维细胞从骨折第3天起就出现于骨折局部[[血肿]]中,骨折后5天即在[[机化]]血肿及骨折断端的间隙及其周围大量存在,是参与纤维骨痂阶段的主要细胞成分。在此阶段成纤维细胞一方面大量分裂增殖,一方面又合成和分泌大量Ⅰ型胶原,使肉芽组织逐步变成疏松的结缔组织,将骨断端包围起来,形成接合两骨折断端的巨大的纤维骨痂。然而,这种由无数成纤维细胞和丰富的肉芽组织为主体构成的[[纤维结缔组织]]却不会演变为在其它组织创伤修复时常见的[[瘢痕组织]],而是通过钙盐结晶在其内部不断沉积,逐渐演变为骨性骨痂,使骨折局部的修复达到骨性愈合,恢复骨组织的结构。此时,[[骨折愈合]]部只有骨组织而不再存在成纤维细胞。 ==培养== 成纤维细胞的分离培养一开始并不涉及[[成骨作用]],而主要是用于研究细胞的老化、各种外来因子对细胞的损伤、细胞在体外条件下的恶性转化、以及某些先天性代谢异常、酶缺陷等。由于[[皮肤]]成纤维细胞易于获取,又易于在体外生长,故目前皮肤成纤维细胞培养已在[[基础医学]]和临床医学研究中得到较广泛的运用,其分离培养技术已相对成熟,对其体外生长规律也有了较全面的认识。 成纤维细胞的[[原代培养]]可用酶[[消化]]法或组织块法,其中组织块法又因其操作简便、条件易于控制而应用更为普遍。通常,以酶消化法获得的成纤维细胞悬液在[[接种]]后5~10min即可见细胞以[[伪足]]初期附着,与[[底物]]形成一些接触点;然后细胞逐渐呈放射状伸展,胞体的中心部分亦随之变扁平;最快者大约在接种后30min,细胞贴附底物即较为完全,呈现成纤维细胞的形态。采用组织块法则大约在接种后2~3天[2,3]到1周左右,在接种的皮肤组织块周围长出细胞。待[[细胞融合]]成片,[[铺满培养]]容器底壁大部分时即可进行[[传代]]。一般都采用[[胰蛋白酶]](trypsin),将成纤维细胞从底壁消化下来后分瓶作[[传代培养]]。成纤维细胞在体外培养条件下能保持良好的分裂增殖能力。细胞分裂时变为球形;分裂后又平铺在附着物的表面成为有突起的扁平细胞。体外培养的成纤维细胞,其生命期限与[[物种]]等因素有关。例如:人胚成纤维细胞约可培养50代;[[恒河猴]]皮肤成纤维细胞能传代超过40代;鸡胚成纤维细胞则只有少数能培养30代;而小鼠成纤维细胞多数只能生长8代左右。另外,从老年个体取得的成纤维细胞的寿命要比取自年轻者短。由于在细胞传代和进行体外培养时,细胞的[[生物学]]特性会逐渐发生一些不同于体内的改变,故通常只将前10代视这正常细胞,可在此时将生长旺盛的成纤维细胞冻存起来,以备将来[[复苏]]使用,这在将培养的细胞由动物实验向人体实验过渡的过程中必须给予足够的重视。 ==展望== 尽管成纤维细胞受哪些因素诱导可以产生成骨作用、这些因素的诱导方式及其机制如何以及成纤维细胞在骨形成中是否分化为成[[骨细胞]]等等问题尚未完全解决,但成纤维细胞经诱导可以形成骨组织这一现象已逐渐为广大科学工作者所接受。由于成纤维细胞直接参与了骨折愈合过程中纤维性骨痂的形成,其自身又具备被诱导成骨的能力,可以设想,利用成纤维细胞分布广泛、取材方便、对机体损伤较小、体外培养容易[[成活]]、增生繁殖较快等较其它具有成骨作用的细胞(如[[骨膜]]成骨细胞、[[骨髓]][[基质细胞]]等)优越之处,在体外大量培养[[扩增]]成纤维细胞,并施以有效的诱导因素(如上皮细胞、TNG-α和BMP等)使其具备成骨效能,然后与合适的生物材料载体复合,同时使该[[复合体]]在体外或体内保持良好的成骨能力并进行一定程度的成骨,则有望获得具有一定的生物力学支撑强度而成骨作用又保持活跃的“活骨”复合体,用以替代自体骨或异体骨[[回植]]体内治疗难以自身修复的较大的骨缺损,这无疑将为骨缺损的修复治疗开辟一条新的有辉煌前景的道路。在组织工程技术和生物材料科学已有较大发展的今天,这一设想是极有可能实现的。当然,从目前所处的实验阶段过渡到临床应用尚有很大一段距离,需要解决的问题还很多,而且随着研究的展开和深入,问题可能还会越来越多,但这确实是一项很有临床应用价值和社会、经济效益的重大课题,值得广大基础医学工作者和临床科研人员为之而努力。 [[分类:医疗健康]][[分类:结缔组织]][[分类:解剖学及组织胚胎学]][[分类:细胞生物学]]
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