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[[核糖核酸酶A]] [RNase A] 核糖核酸酶A是内切[[核糖核酸酶]],可特异地攻击RNA上[[嘧啶]][[残基]]的3'端,切割与相邻[[核苷酸]]形成的[[磷酸二酯键]]。反应终产物是嘧啶3'[[磷酸]]及末端带嘧啶3'磷酸的[[寡核苷酸]]。无[[辅因子]]及二价阳离子存在时,核糖核酸酶A的作用可被[[胎盘]]RNA酶抑制剂(B1ackburn et al.1977)或氧钒—[[核糖核苷]][[复合物]](Puskas et al.1982)所抑制。 用途 (1)从DNA-RNA或RNA—RNA杂合体中去除未杂合的RNA区。 (2)确定DNA或RNA中单[[碱基]][[突变]]的位置(Myers et al.1985,Winter et al.1985)。 在此方法中,RNA-DNA或RNA-RNA杂合体上的单碱基错配可被RNA酶A识别并切割。利用含SP5或T7[[噬菌体]][[启动子]]的[[质粒]],在体外合成与[[野生型]]DNA或RNA互补的32p标记RNA[[探针]],然后与待检含单[[碱基置换]]的DNA或RNA退火, 所产生的单碱基错配可用RNA酶A切割,通过[[凝胶电泳]]分析切割产物的大小即可确定错配的位置。在所有各种可能的单碱基错配中,大约50%可用此法确定。 {{蛋白质三级结构}}
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