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'''生物化学技术'''(biochemical techniques),用于[[生物化学]]大分子研究的独特的分析、制备实验技术,这些实验方法也是深入阐明疾病[[分子]]机理的重要手段。 近代生物化学研究的发展已从[[细胞]]水平、亚细胞水平,深入到[[生物]]大分子水平,甚至能研究分子内的结构与功能关系,能进行分子的改造和重建以改变生物性状。生物化学研究的任一突破性进展,无不与新的实验技术方法的创建密切关联。没有超速离心技术的发展,具有[[生物学]]活性的亚细胞组分的分离是不可能的。[[电泳]]方法是一类重要的[[生物化学技术]],现在不仅能借电泳以分离制备较大规模的生物大分子,还能从单一样品中,分辨出成百上千的不同[[蛋白质组]]分或[[核酸]]片段。[[毛细管电泳]]的问世,更使分析微量化到1nl水平。在临床医学中,电泳可帮助分析各种[[脂蛋白]]成分,使各种[[高脂蛋白血症]]得以区别;以电泳分析[[同工酶]]成分或[[酶谱]],得以区分其所来源的病变组织或疾病的不同发展阶段。[[基因重组]]技术在生物科学中已掀起一场划时代的革命。现在在实验室里就可随意剪切拼接[[基因]],可人工合成基因,并将其引入细胞中以指导合成相应的新[[蛋白质]],改变细胞的遗传性状。临床上已应用基因[[探针]]以诊断某些[[遗传性疾病]]、[[恶性肿瘤]]和[[乙型肝炎]]等。 生物化学实验技术的主要特点是:①操作温和,使对所研究组分的天然结构和功能的损害,尽可能减少至最小。②微量或痕量分析,低达ng或pg水平;或大量分离制备,高达公斤级。③分辨率高,可明确区分结构或性质极其相似的物质。 重要的现代生物化学实验技术,按其目的和性质大致可分为三大类。 一是按不同的物理化学性质进行分析鉴定和分离制备,其中又可分为五类:①根据分子的大小进行分辨者,有[[凝胶过滤法]]、[[超速离心法]]、[[超滤]]法、 SDS电泳分析等。②根据分子荷电情况进行分辨者,有[[等电聚焦]][[电泳法]]、离子交换[[层析]]法等。③根据吸收[[光谱]]和[[放射性]]等性质进行分辨者,有紫外/红外/荧光分光光度法、[[X射线]]结构分析法、[[电子顺磁共振]],[[电子自旋共振]]和[[核磁共振]]法,以及[[放射性核素]]示踪和放射免疫分析法等。④根据疏水相互作用或氢键形成的引力进行分辨者,有反相[[高效液相层析]]、[[分子杂交]]技术等。⑤根据特异相互作用进行分辨者,有亲和层析、[[免疫化学]]分析法等。 二是经一系列不同的[[化学]]和[[物理]]方法处理,以求得差异分辨,或按指令合成不同的高分子物质。如[[氨基酸]]序列分析和序列合成、[[核苷酸序列]]分析和序列合成等。 三是有目的地对 [[DNA]]进行剪切拼接,引入细胞中的[[DNA重组技术]](或[[分子克隆]]技术)和[[单克隆抗体技术]]等。 为使这些生物化学技术实现高效自动化、灵敏精确重复性好、特异性高,人们设计了一系列有微机控制的高性能仪器,使生物化学实验技术更臻完美。必须强调指出的是,技术方法是十分重要的实验手段,但更重要的是科学家运筹帷幄的战略设计。只有巧妙地利用不同的生物化学实验技术,方能达到预期的研究目的。
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